Morfología de eritrocitos, microscopía de contraste de fase

Contraste microscopico es un procedimiento diagnóstico utilizado en urología y nefrología (estudio de los riñones) para el examen y evaluación de muestras citomorfológicas vitales (muestra con células vivas) en el diagnóstico de hematuria y sedimento urinario. La importancia destacada de este método se basa en particular en la posibilidad, relevante para el diagnóstico, de evaluar la morfología de los eritrocitos (forma del rojo sangre células), que puede proporcionar información valiosa sobre el origen de una posible hematuria (sangre en la orina) o eritrocituria (glóbulos rojos en la orina). Contraste microscopico de sedimento de orina es ideal para evaluar diversas formas de eritrocitos.La introducción de contraste microscopico en el diagnóstico de rutina puede considerarse un avance importante, ya que facilita la distinción entre los componentes patognomónicos de la orina y los artefactos no patológicos. La microscopía de contraste de fase es superior a la microscopía de campo claro, que se utilizó hasta la introducción de la microscopía de contraste de fase, con respecto a la diferenciación de artefactos. Si hay un hallazgo poco claro o no concluyente, recurrir a este procedimiento puede ahorrar medidas menos útiles como el diagnóstico radiológico o cistoscópico (cistoscopia) para la hematuria glomerular (ver más adelante), reduciendo así los costos y ahorrando tiempo de tratamiento.

Indicaciones (áreas de aplicación)

La microscopía de contraste de fases se utiliza en urología y nefrología para estudiar la morfología de los eritrocitos:

  • Evaluación de muestras citomorfológicas vitales en el diagnóstico de hematuria y sedimento urinario Indicación:> 6-8 eritrocitos/ l detectable en orina o prueba de estrías positivas En el contexto de la morfología de los eritrocitos, la diferenciación de la hematuria glomerular de la eritrocituria no renal se realiza mediante la detección de dismórficos (glomerulares) y eumórficos eritrocitos.
  • La hematuria dismórfica de origen glomerular se encuentra en pacientes con membranosa y glomerulonefritis membranoproliferativa, así como nefropatía por IgA, nefroesclerosis focal y segmentaria y nefritis lúpica. En la hematuria glomerular, los eritrocitos son forzados a atravesar las membranas basales dañadas de los capilares glomerulares, causando daño. Microscópicamente, se reconocen eritrocitos dismórficos, que también se denominan acantocitos (= eritrocitos con “orejas de Mickey Mouse”).
  • La hematuria eumorfica (hematuria posglomerular) se encuentra en pacientes con quistes renales en ruptura en el sistema hueco, vejiga Bilharzia, sangre mezcla de la vagina (vagina), lesión después de la colocación de un sonda vesical, sangre trastornos de la coagulación, etc.

El procedimiento

El principio de la microscopía de contraste de fase se basa en la interferencia de los rayos de luz en la trayectoria del haz del microscopio, que puede lograr una imagen de alto contraste de células no teñidas. Estructura y función del microscopio de contraste de fase:

  • La abertura anular, el condensador, la placa de fase anular y el objetivo son de particular importancia para la función del microscopio de contraste de fase. Al insertar la abertura anular en el condensador y la placa de fase en el objetivo, se produce una separación de los rayos de luz difractados y no difractados. El retraso resultante en la longitud de onda de los rayos de luz difractados evoca una diferencia de fase que ópticamente hace que los detalles estructurales del objeto microscópico bajo examen parezcan más oscuros que el medio circundante. Físicamente, la fase plaquetas convertir las diferencias de fase o trayectoria en diferencias de amplitud. Como resultado de estas diferencias de amplitud, la imagen del objeto aparece en el microscopio por cancelación o amplificación mutua de los rayos de luz directa que atraviesan el objeto y se difractan en el objeto.
  • Por tanto, una desventaja de este principio es el hecho de que las preparaciones de fase ideales no son la regla, ya que los efectos de amplitud suelen superponerse a los efectos de fase.
  • Basado en el principio de obtener imágenes de las estructuras por diferencias de amplitud, las estructuras celulares existentes se representan como tonos de gris graduados en función de su propia óptica. densidad. Para mejorar la reproducción de las estructuras, el uso de preparaciones finas y fase. plaquetas Dependiendo de la naturaleza de las distintas fases plaquetas, se pueden lograr contrastes de fase tanto positivos como negativos, lo que da como resultado que los objetos de interés se muestren más oscuros o más brillantes que su entorno.
  • En microscopía de contraste de fase, es además importante tener en cuenta que necrosis (muerte de células) puede ocurrir relativamente rápido debido a la exposición a la luz y daño adicional a las células vitales. Como resultado de este rápido necrosis desarrollo, la evaluación de los portaobjetos debe realizarse dentro de una a dos horas para mantener el validez de la medida de diagnóstico. Por lo tanto, esta limitación de tiempo en la evaluación de muestras vitales generalmente requiere documentación mediante fotomicrografía o, si es necesario, mediante microcinematografía. Una microfotografía es una fotografía de una imagen microscópica tomada con una cámara conectada a un microscopio. A través de la microcinematografía, existe la posibilidad de capturar objetos bajo observación microscópica en imágenes en movimiento.
% de eritrocitos dismórficos Valor clínico
<20 Sin glomerulopatía
20 - 50 Posible glomerulopatía
51 - 75 Muy sospechoso de glomerulopatía
> 80 Cierta glomerulopatía