En el proceso antisentido, los oligonucleótidos antisentido (ribonucleótidos no codificantes monocatenarios cortos ácidos) se introducen en la célula principalmente a través de liposomas (vesículas que a menudo consisten en Fosfolípidos). En este proceso, el ARNm se degrada en poco tiempo.
Una introducción del núcleo celular de un gen La codificación del ARNm por medio de vectores (plásmido modificado (anillo de ADN) de una bacteria) es más eficaz: la síntesis del ARN antisentido tiene lugar continuamente de esta manera.
El ADN viral real se ha modificado de tal manera que no se produce ni la replicación (duplicación) ni la transcripción (síntesis de ARN utilizando ADN como plantilla) de los genes virales.
Formando hidrógeno enlaces, el oligonucleótido antisentido se une al (pre) -mRNA complementario.
Pueden ocurrir tres escenarios:
- El oligonucleótido antisentido añadido está mediado por ribonucleasa H. En este caso, el (pre) -mRNA se corta (es decir, degradación -> pérdida de función del mRNA). Por tanto, falla la traducción del ARNm a la proteína.
- Después de unirse al ARNm, se produce el llamado impedimento estérico. Es decir, apego de celular proteínas - especialmente Ribosomas - por tanto, ya no es posible. Por tanto, la traducción a la proteína tampoco es posible.
- Influencia en el empalme (proceso de modificación por el llamado espliceosoma (construcción de cinco ARN no codificantes diferentes llamados snRNA, a los que proteínas están unidos en cada caso) como parte del procesamiento de ARN ((pre) -mRNA a mRNA). Los mecanismos de corte y empalme alternativos (p. Ej., El intrón no se empalma o el exón está empalmado) se pueden omitir y se pueden cortar los exones (= omisión de exón; los exones normalmente se dejan en el ARNm). El oligonucleótido antisentido previene la eliminación del exón que es esencial para la función de la proteína, en otros casos para corregir parcialmente las mutaciones de Raster shift (deleción o inserción, de modo que el ADN a partir de ese momento tenga tripletes de bases fundamentalmente diferentes, lo que cambia significativamente la estructura de la proteína), el ARN antisentido también puede causar el corte de ciertos segmentos de ARN que de otro modo no se empalmarán. A pesar de que la proteína discretamente truncada se ha “reiniciado” desde el sitio de eliminación al marco de lectura del ARNm a un estado no patológico.
Terapia
Existe un uso del procedimiento desde 2017 en Alemania para el terapia forestal of atrofia muscular en la columna (SMA), actuando sobre el empalme.
En los Estados Unidos, el procedimiento también se utiliza (también con acción de empalme) para algunas formas de tipo Duchenne. distrofia muscular.
En aras de la integridad, el procedimiento de inserción de un nuevo gen Se discutirá: Por medio de un vector, un gen que no está presente en el ADN se introduce en el núcleo de la célula. Por lo general, esto codifica una proteína en cuyo gen una mutación estaba presente en el paciente y no podía cumplir la función "deseada". En 2019, este procedimiento fue aprobado en Estados Unidos para el tratamiento de atrofia muscular en la columna.
