La prueba ELISA es un examen médico de laboratorio, durante el cual se produce la llamada reacción antígeno-anticuerpo. Se pueden probar diferentes antígenos que desempeñan un papel en la medicina humana o veterinaria. Solo los institutos de laboratorio acreditados están autorizados a realizar la prueba en Alemania.
¿Qué es el procedimiento?
Dentro de los exámenes médicos de laboratorio, la prueba ELISA pertenece a los denominados procedimientos inmunológicos. A través del procedimiento de prueba, la proteína moléculas puede detectarse en muy diferentes fluidos corporales. ELISA es la abreviatura de Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas. Por lo tanto, es una designación en idioma inglés que, sin embargo, se ha establecido en el uso médico alemán. La prueba ELISA pertenece a los denominados procedimientos inmunológicos dentro de los exámenes médicos de laboratorio. El procedimiento de prueba se puede utilizar para detectar proteínas. moléculas en una amplia variedad de fluidos corporales. La detección de estos moléculas a su vez permite sacar conclusiones sobre determinadas enfermedades o cuadros clínicos, por lo que los médicos también hacen que su diagnóstico dependa del resultado de dicha prueba ELISA. Por lo tanto, el procedimiento de prueba es de gran importancia en la práctica clínica diaria, ya sea en un entorno ambulatorio o hospitalario. El correspondiente fluidos corporales, por ejemplo entero sangre o fluidos de articulaciones, se envían al laboratorio inmediatamente después de ser recogidos del paciente. Suelen ser muestras bastante urgentes, porque el material nativo se considera sensible y debe examinarse lo antes posible. Las llamadas muestras sobrealmacenadas pueden Lead a resultados falsos negativos porque el patológico proteínas detectarse se han reducido o degradado completamente mientras tanto. Por tanto, los denominados preanalíticos desempeñan un papel importante en ELISA; Los resultados sospechosos o negativos deben repetirse nuevamente si se presentan los síntomas clínicos apropiados.
Función, efecto y objetivos
Para una correcta realización de la prueba en un laboratorio médico acreditado, los tubos de ensayo y las denominadas placas de microtitulación son absolutamente necesarios. Estas placas con finas hendiduras semicóncavas están hechas de plástico especial y cada una está recubierta con un anticuerpo muy específico. Si el antígeno que se va a detectar está presente en un líquido corporal que se va a examinar, se produce una reacción antígeno-anticuerpo específica de acuerdo con el llamado principio de cerradura y llave. El material de muestra puede insertarse en las placas manualmente por el personal del laboratorio con pipetas o de forma totalmente automática. En los institutos médicos de laboratorio modernos, solo se utilizan sistemas totalmente automatizados para el diagnóstico ELISA. Sin embargo, estos deben ser monitoreados por personal capacitado, asistentes de laboratorio médico-técnico. El llamado control de calidad interno y externo también es responsabilidad del personal de laboratorio, superior al personal médico para la medicina de laboratorio, enfermedad infecciosa epidemiología y microbiología. Después del primer lote de prueba, es decir, después de que el material se haya pipeteado en las placas, los antígenos específicos de la muestra, si están presentes, ya se han unido al anticuerpos en la placa de plástico. Luego se realiza un lavado con solución salina fisiológica para eliminar los factores que interfieren, como los antígenos no deseados o proteínas de la preparación. Este paso es muy importante para evitar reacciones falsas positivas. Un resultado falso positivo interpretado por el laboratorio puede tener consecuencias fatales para un paciente. En el segundo paso de la prueba, se agrega otro anticuerpo que se acopla a una enzima. Este anticuerpo marcado también se une al antígeno. En un tercer y último paso, se añade un colorante especial en una cantidad definida, que se degrada en mayor o menor medida por los residuos de enzimas que aún están presentes. Solo se puede degradar dicha enzima, que no estaba previamente unida al antígeno junto con el anticuerpo. La enzima libre puede escindir el tinte agregado. La cantidad exacta de tinte escindido se puede determinar con precisión con otro método de laboratorio, la denominada fotometría. Esto permite sacar conclusiones precisas sobre si el antígeno está presente en un material de muestra y, en caso afirmativo, en qué cantidad. La prueba ELISA se utiliza no solo para el diagnóstico inicial o para confirmar diagnósticos sospechosos de determinadas enfermedades y cuadros clínicos, sino también para monitorear su progreso. Si el antígeno concentración en la prueba disminuye durante el transcurso de terapia forestal, la terapia se considera exitosa.
Riesgos, efectos secundarios y peligros
La prueba ELISA obtiene su valor informativo principalmente a través de la detección de estructuras antigénicas en los fluidos corporales. La prueba permite una declaración denominada cualitativa, pero también semicuantitativa y cuantitativa sobre la presunta presencia de ciertos antígenos en los fluidos corporales. Todo sangre no se puede utilizar para la prueba, solo suero sanguíneo. Una prueba directa en el paciente, por ejemplo del capilar sangre de las yema del dedo, por lo tanto, al igual que con otras pruebas serológicas, no es posible hasta la fecha. En medicina humana, la prueba ELISA se utiliza principalmente para detectar antígenos en infecciones bacterianas, virales o fúngicas. Además, todos los resultados positivos de hepatitis la serología se vuelve a comprobar con una prueba ELISA como estándar. Cierto hormonaspor ejemplo el el embarazo hormona HCG, también se puede determinar con la prueba ELISA. Si ocurren ciertas complicaciones durante el embarazo, conocimiento preciso de la concentración de la hormona del embarazo en la sangre es muy útil desde el punto de vista diagnóstico y terapéutico. Otra indicación para la prueba es la detección de las llamadas paraproteínas en la orina, ya que ocurren, por ejemplo, en varios enfermedades tumorales, como mieloma múltiple. La prueba ELISA todavía se realiza en muchos laboratorios en la actualidad, pero los expertos la consideran obsoleta. La reacción inmune acoplada a enzimas CRISPR-Cas en la prueba ELISA ha sido reemplazado cada vez más en los últimos años por marcado radiactivamente anticuerpos, que proporcionan un resultado de medición cuantitativo aún mejor. Estas pruebas también se denominan RIA, Ensayo de radioinmunabsorción. Otros avances específicos de ELISA son los métodos químicos ligeros como la luminiscencia o la fluorescencia.
