secuencia ADN
En la secuenciación de ADN, se utilizan métodos bioquímicos para determinar la secuencia de nucleótidos (molécula de base de ADN con azúcar y fosfato) en una molécula de ADN. El método más utilizado es el método de terminación de cadena de Sanger. Dado que el ADN está compuesto por cuatro bases diferentes, se realizan cuatro enfoques diferentes.
Cada enfoque contiene el ADN que se va a secuenciar, un cebador (molécula inicial para la secuenciación), ADN polimerasa (enzima que extiende el ADN) y una mezcla de los cuatro nucleótidos necesarios. Sin embargo, en cada uno de estos cuatro enfoques se modifica químicamente una base diferente de tal manera que se puede incorporar pero no proporciona un punto de acción para la ADN polimerasa. Esto luego conduce a la terminación de la cadena. Este método produce fragmentos de ADN de diferentes longitudes, que luego se separan químicamente mediante la denominada electroforesis en gel de acuerdo con su longitud. La clasificación resultante se puede traducir en la secuencia de nucleótidos en la sección de ADN secuenciada marcando cada base con un color fluorescente diferente.
Hibridación de ADN
La hibridación de ADN es un método genético molecular que se utiliza para demostrar la similitud entre dos hebras simples de ADN de diferente origen. Este método aprovecha el hecho de que una doble hebra de ADN siempre se compone de dos hebras simples complementarias. Cuanto más similares sean ambas cadenas sencillas entre sí, más bases forman una conexión sólida (enlaces de hidrógeno) con la base opuesta o se forman más pares de bases.
No se producirán emparejamientos de bases entre las secciones de las dos cadenas de ADN que tienen una secuencia de bases diferente. El número relativo de compuestos puede determinarse ahora determinando el punto de fusión en el que se separa la doble hebra de ADN recién formada. Cuanto más alto es el punto de fusión, más bases complementarias han formado enlaces de hidrógeno entre sí y más similares son las dos hebras simples. Este método también se puede utilizar para detectar una secuencia de bases específica en una mezcla de ADN. Para este propósito, los fragmentos de ADN formados artificialmente se pueden marcar con colorante (fluorescente). Estos sirven para marcar la secuencia de bases correspondiente y así hacerla visible.
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