La hibridación fluorescente in situ (FISH) es un método de cribado genético para la detección de ADN (ácido desoxirribonucleico) en núcleos de células individuales.
Este método implica el uso de sondas de ADN específicas que solo pueden proporcionar información sobre las regiones genómicas para las que la sonda utilizada es específica.
Indicaciones (áreas de aplicación)
- Sospecha de aberración cromosómica numérica:
- Detección de anomalías cromosómicas numéricas (p. Ej., Trisomía 21).
- Para la cuantificación de mosaicos de aberraciones cromosómicas (p. Ej., En Ullrich-Síndrome de Turner).
- Detección de microdeleciones (p. Ej., Monosomía 22q11.2).
- Detección de aberraciones cromosómicas (p. Ej., leucemia linfocítica crónica (CLL), no Hodgkin linfoma).
Las indicaciones anteriores se analizan mediante FISH en interfase (consulte “Procedimiento de laboratorio” para obtener más detalles).
El procedimiento
Material requerido
- Sangre de heparina (mínimo 1-2 ml)
Preparación del paciente
- No es necesario
Factores disruptivos
- Ninguno conocido
El método de laboratorio
La hibridación fluorescente in situ (FISH) implica el uso de sondas de ADN marcadas con fluorescencia (sondas FISH). Estos pueden unirse a un sitio de ADN específico en un cromosoma, lo que se llama hibridación. Tras o después de la unión de la sonda marcada con fluorescencia, la evaluación se puede realizar usando un microscopio. En este proceso, se determina el número de señales de fluorescencia dentro de los núcleos en interfase. Además, una evaluación de la ubicación (por ejemplo, translocación / cambio de ubicación / a otro cromosoma) en la metafase cromosomas es posible.
Cuando diferentes fluorescentes tintes se utilizan para diferentes ADN diana en el procedimiento FISH, se denomina FISH multicolor. Esto permite una visualización completa del genoma.
En algunos casos, la sonda de ADN no se marca directamente con un tinte fluorescente, lo que se denomina procedimiento indirecto. En cambio, está etiquetado con sustancias como biotina o digoxigenina. Este método se considera más complicado pero es más sensible.
