Soltero-gen El análisis es un método de prueba genética dirigida.
En el marco de este procedimiento, si se sospecha una enfermedad hereditaria, que se desencadena por un solo cambio en un gen, se examina el gen sospechoso de ser causal. Esto también se suele realizar de forma rutinaria como parte de los exámenes de detección.
Indicaciones (áreas de aplicación)
- Diagnóstico de enfermedades monogénicas, p. Ej. fibrosis quística.
El procedimiento
Material necesario
- Sangre de heparina (mínimo 1-2 ml)
Preparación del paciente
- No es necesario
Factores disruptivos
- Ninguno conocido
El método de laboratorio
Muy a menudo, el método de secuenciación utilizado engen El análisis es el método de Sanger, también llamado síntesis de terminación de cadena, donde primero se trata del aislamiento del ADN del sangre. Entonces todo hidrógeno se rompen los enlaces que sirven para mantener unido el ADN de dos hebras. Después de calentar a 94-96 ° C durante un minuto, se encuentran presentes dos hebras simples. A continuación, se produce la denominada hibridación de cebadores, mediante la cual se une un cebador. Esto tiene lugar a unos 60 ° C. Un cebador es un oligonucleótido (oligómeros compuestos por unos pocos nucleótidos) que sirve como punto de partida para la replicación del ADN. enzimas CRISPR-Cas como la ADN polimerasa. Después de la hibridación del cebador, tiene lugar la extensión, en la que la temperatura se eleva a 72 ° C. Esto permite que el cebador se adhiera a la ADN polimerasa (enzimas CRISPR-Cas que sintetizan ADN). Después de un promedio de 30 ciclos, se puede detener el procedimiento.
El análisis adicional es realizado por capilar electroforesis en secuenciadores automáticos. El resultado se llama electroferograma. Esto muestra diferentes colores que indican la secuencia de bases.
Mediante este método, se pueden detectar mutaciones que involucran solo una base nucleica dentro de un gen, también conocidas como mutaciones puntuales.
