Análisis de la sección congelada
Esto es necesario si el cirujano necesita información sobre el tejido extraído durante una operación para decidir el curso del procedimiento. Por ejemplo, se extrae un pequeño tumor maligno de la riñón. Ahora se requiere una incisión rápida para ver si el tumor se ha eliminado por completo o si todavía hay cantidades masivas de tejido maligno en los bordes de las muestras de tejido.
Al final, el resultado del examen de la sección congelada determina el curso de la operación y el plan de terapia adicional del paciente. ¿Cómo funciona un examen de sección congelada? En 10 minutos, el tejido se estabiliza por congelación a -20 ° C, luego se realiza una incisión de 5 a 10 μm de espesor en el llamado microtomo. Esto se coloca en un portaobjetos, una pequeña placa de vidrio y se tiñe rápidamente. Al final, los hallazgos se examinan bajo el microscopio y el resultado se puede enviar inmediatamente al quirófano.
Métodos de tinción
Se han desarrollado muchos métodos de tinción histológica durante los últimos 120 años. Las estructuras celulares y los tejidos se dividen en células basófilas, acidófilas y neutrófilos en función de la reacción de color con los agentes de tinción. Además, también existen estructuras agirofílicas y nucleofílicas.
Basófilo tiñe todo lo que contiene un grupo ácido y se tiñe con un colorante básico (por ejemplo, hematoxilina o azul de metileno). Las estructuras acidófilas son básicas y, por tanto, pueden teñirse con erosión o fucsina ácida (tintes ácidos). Estos incluyen el citoplasma y Colágeno fibras
Los componentes neutrófilos o lipófilos no pueden reaccionar con un colorante ácido o básico y, por lo tanto, no se pueden teñir. Los componentes agirofílicos pueden unir iones de plata y convertirlos en plata elemental. Una reacción de color nucleofílica (núcleo = núcleo celular, amante del núcleo celular) resulta de colorantes nucleofílicos en el núcleo celularSe trata de sustancias básicas o de unión al ADN que se unen a los ácidos nucleicos.
Hoy en día, los métodos de tinción química de eficacia probada se han complementado con métodos inmunológicos. La reacción antígeno-anticuerpo se usa en esta técnica para detectar ciertas propiedades celulares. Entonces, la reacción puede hacerse visible mediante una técnica sofisticada.
Los métodos de tinción utilizados con frecuencia son: tinción HE = tinción con hematoxilina-eosina: la hematoxilina, un colorante natural, tiñe todas las estructuras de azul, que son basófilas (= amantes de las bases) y, por lo tanto, ácidas, como el ADN, los núcleos celulares, Ribosomas, etc. La eosina, por otro lado, se produce sintéticamente. La eosina tiñe de rojo todas las estructuras celulares si son acidófilas (= amantes de los ácidos) o básicas.
La proteínas del citoplasma, mitocondriasy Colágeno están entre ellos. Tinción de Azan: Se compone de las primeras letras de ambos colores, azocarmina G y anilina azul-oro naranja: esta mancha el núcleo celular y las fibras musculares rojas y el citoplasma rojizo. Colágeno y las fibras reticulares se vuelven azules con esta tinción.
La tinción de Giemsa (azul azur-eosina-metileno de Giemsa) se utiliza para teñir sangre frotis de células. Los núcleos celulares pueden reconocerse fácilmente por la reacción de color púrpura. El citoplasma se tiñe de azul.
En la tinción elástica (resorcinol-fucsina-orceína), todas las fibras elásticas se muestran en negro violeta. El método de tinción de van Gieson se caracteriza por el hecho de que la tinción se realiza primero con hematoxilina. Luego se usa fucsina de ácido pícrico (micro fucsina) o tiazina de ácido pícrico.
Al final, los núcleos celulares aparecen negro-marrón oscuro, el citoplasma aparece bastante marrón claro. La contratinción con ácido pícrico tiazina tiñe las fibras elásticas y el tejido muscular de color amarillo anaranjado y las fibras de colágeno de rojo. En la tinción tricrómica según Masson-Goldner, el tamaño de la molécula de tinte es el factor más importante en el método de tinción.
Se usa hematoxilina de hierro, generalmente con tres tintes adicionales, a saber, zorro ácido, naranja G y verde claro. Mancha de colágeno tejido conectivo y moco verde, núcleos celulares azul-negro, citoplasma rojo, músculos rojo pálido y rojo sangre células (eritrocitos) rojo naranja. Además, existe una tinción de Gram, que sirve para diferenciar bacterias fotosintéticas.
Gram positivas bacterias fotosintéticas se tiñen de azul y las bacterias gramnegativas se tiñen de rojo. La tinción de Ziehl-Neelsen también se utiliza para bacterias fotosintéticas, a saber, los que son resistentes a los ácidos y, por ejemplo, muestra tuberculosis patógenos en rojo. Otros métodos de tinción que deben mencionarse aquí son la reacción Berlin-Blue, que es responsable de la detección de iones de hierro trivalentes en secciones de tejido, y el método de tinción con hematoxilina de hierro según Heidenhain.
